- L’ADN doit être extrait des prélèvements récoltés. On récolte l'ADN à partir d'échantillons de sang, de sperme. Les cellules sont lysées afin de libérer l’ADN de celles-ci. Ensuite, on élimine les protéines et les débris cellulaires du mélange et l’ADN est purifié. Une quantité de 1 à 2 nanogrammes d’ADN par échantillon suffisent à d’effectuer une analyse génétique.
- La PCR en temps réel permet d’évaluer la quantité d’ADN contenue dans l’échantillon de départ en fonction de la quantité de fluorescence qui est émise après un certain nombre de cycles.
- La PCR en temps réel permet d’évaluer la quantité d’ADN contenue dans l’échantillon de départ en fonction de la quantité de fluorescence qui est émise après un certain nombre de cycles.
* Exemple de résultat d’une analyse par RFLP d’une région polymorphique de l’ADN. L’analyse a été effectuée à partir d’un échantillon de sperme prélevé sur la victime:
Piste 1 et 6: marqueurs de poids moléculaire (référence afin d’évaluer la taille des fragments amplifiés)Piste 2: profil de l’ADN du technicien, afin de vérifier qu’il n’y a pas eu de contamination lors de la manipulation
Piste 3: profil de l’ADN de la victime
Piste 4 et 5: profil des 2 suspects
Piste 7: profil de l’ADN contenu dans le prélèvement de sperme
=>Le profil de la piste 7 correspondant à celui de la piste 4, cette piste correspond à celle du coupable.
* Exemple de tests de paternité obtenu lors d’une analyse par PCR:
(De haut en bas) Mère, Enfant, Père n°1
(De haut en bas) Mère, Enfant, Père n°2
La migration des produits de PCR lors de l’électrophorèse est analysée par un programme informatique. La comparaison entre la taille des fragments amplifiés chez la mère, l’enfant, et les 2 pères potentiels, permet d’établir lequel est le père biologique de l’enfant. C’est le père n°2.
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